过滤浓缩：
将一定体积（通常是100ml或更大）的待测液体样品（如药品、纯化水、注射用水、饮料等）倒入仪器的无菌滤杯中。
滤杯底部放置一张具有特定孔径（最常用的是0.45微米）的无菌滤膜。这个孔径足以让液体和小分子物质通过，但会截留样品中存在的细菌、酵母菌和霉菌孢子等微生物。
仪器通过真空泵（负压抽滤） 或注射器正压的方式，施加压力，使样品液体快速通过滤膜，流入下方的废液瓶或接收器中。
核心目的： 将样品中可能分散存在的微生物浓缩截留在滤膜表面这一微小区域上。这对于检测低微生物负荷的样品（如注射用水、高纯液体）至关重要。
去除样品基质干扰/抑菌成分（选择性步骤）：
如果待测样品本身含有抑菌或杀菌成分（如某些抗生素制剂、含防腐剂的化妆品、高渗透压溶液等），直接过滤后培养，这些残留成分会抑制滤膜上微生物的生长，导致假阴性结果。
为了解决这个问题，在样品过滤后（有时也在过滤中），需要用适量的无菌稀释液（通常是0.9%无菌生理盐水、缓冲蛋白胨水或磷酸盐缓冲液） 对截留在滤膜上的微生物进行多次冲洗（通常是3次，每次100ml）。
核心目的： 冲洗掉样品基质，特别是其中的抑菌/杀菌成分，消除其对后续微生物生长的抑制作用，确保结果的准确性。这是薄膜过滤法相对于其他方法（如平皿倾注法）在处理复杂样品时的一大优势。
总结微生物限度仪的核心原理：
利用特定孔径（0.45µm）的滤膜作为物理屏障，在负压或正压驱动下，让液体样品快速通过，将其中的微生物高效地截留并浓缩在滤膜表面。通过无菌冲洗去除潜在的抑菌成分干扰后，将滤膜转移到适宜的固体培养基上培养，使截留的微生物生长形成菌落，最终通过菌落计数来定量测定样品中的需氧菌总数和霉菌酵母菌总数。
主要优势：
大体积样品检测： 可处理大体积样品（如100ml, 200ml, 甚至更大），大大提高检测低污染水平样品的灵敏度（检出限低）。
去除抑菌成分： 冲洗步骤能有效去除样品中的抑菌/杀菌剂，减少假阴性。
浓缩效应： 微生物被浓缩在滤膜小区域，易于观察计数。
适用性广： 适用于各种澄清或轻微浑浊的液体样品（水、注射液、眼药水、口服液、化妆品原料水相等）。