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根据《中国药典》2015年版纯化水微生物限度检查要求，具体操作标准如下：
一、核心检查方法：薄膜过滤法
?样品处理?
取纯化水样品不少于1ml（实际操作中常取50ml或100ml以提高检测灵敏度）；
通过孔径为0.45μm的混合滤膜（直径50mm）过滤，减压抽干。
?培养与计数?
过滤后取出滤膜，贴敷于R2A琼脂培养基平板上；
在30–35℃培养箱中培养3天后进行菌落计数
（2）过滤操作
将浸泡后的滤膜置于过滤装置滤网上，用无菌镊子固定；
注入样品溶液，启动真空泵抽滤至滤膜无水滴残留；
用100ml缓冲液（如0.9%氯化钠溶液）冲洗滤膜3次，去除干扰物。
（3）培养观察
将滤膜贴合于R2A平板，避免气泡产生；
每日观察记录菌落生长情况（24h、48h、72h）
注意事项
?样品体积选择?：
中国药典规定至少1ml，但实际建议取10–100ml以提升痕量微生物检出率；
美国/欧洲药典推荐使用10ml样品。
?防止污染措施?：
操作需在超净工作台中进行；
过滤装置使用前需用乙醇或次氯酸溶液进行管路消毒。
?结果有效性?：
若阴性对照长菌，需重新检测并排查灭菌环节